1　试剂

1.1　乙醚

不应含过氧化物，否则应加硫酸亚铁蒸馏。

1.2　20%氢氧化钠溶液

取氢氧化钠100g，加蒸馏水至500ml。

1.3　碱性吡啶

20%氢氧化钠溶液2份，加吡淀5份，振摇至呈硷性，放置分层，取上层液（此液需临时配制，如显红色，吡啶需重蒸馏）。

1.4　95%乙醇

1.5　标准氯仿液

精密量取氯仿1ml于100ml容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，为1%氯仿溶液。临用前用蒸馏水准确稀释10倍，为0.1%(ml/ml)氯仿标准液。

2　操作

2.1　样品

精确量取样品1ml加蒸馏水4ml。精确量取样品稀释液0.5ml于玻塞试管中，加乙醚18ml，猛烈振摇3分钟，静置。于刻度玻塞试管中加5ml碱性吡啶。加5ml乙醚提取液，混匀，置80℃水浴中加热8分钟，取出后用水冷却，加蒸馏水至12ml，充分振摇，静置分层，倾去上层液，用绿色滤光片比色。

2.2　标准曲线

精确量取0.1%氯仿标准液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，各管加蒸馏水至0.5ml，其余操作同样品，可得一标准曲线。

3　计算

由标准曲线查得样品稀释液相当标准氯仿液之ml数A。

样品氯仿含量=A%（ml/ml）

附注

1.配制碱性吡啶的氢氧化钠须不含碳酸钠，否则有混浊现象。

2.可做限度测定